MyQuVigen™ – Streptavidin, emi 635 nm

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MyQuVigen納米顆粒是超順磁性氧化鐵和量子點(diǎn)的組合。它們提供了高磁矩和明亮穩(wěn)定的熒光，非常適合廣泛的、多重?zé)晒獬上竦目煽卮挪僮?。MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒(emi 635 nm)可以普遍結(jié)合生物素綴合的抗體。它們的最大熒光發(fā)射位于635 nm。激發(fā)波長可以是488納米或更短。MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆?；蛳掠螐?fù)合物易于使用磁性架(目錄號(hào)A20006)進(jìn)行分離。

MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒(emi 635 nm)與小鼠抗體一起理想地用于從組織或器官獲得的細(xì)胞群體混合物中分離或標(biāo)記細(xì)胞(例如CTC、干細(xì)胞)。分離的細(xì)胞用強(qiáng)熒光標(biāo)記，并可直接用于顯微鏡成像或其他基于熒光的細(xì)胞分析。分離的細(xì)胞也是活的，可以進(jìn)一步培養(yǎng)或用于下游分子分析，如mRNA分離和RT-PCR。使用MyQuVigen納米顆粒進(jìn)行細(xì)胞分離無需使用色譜柱，因此細(xì)胞不會(huì)因通過色譜柱基質(zhì)而受到機(jī)械應(yīng)力的影響。磁性分離的細(xì)胞高度純化，并保持其活力，是下游應(yīng)用的理想選擇。

鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒用于細(xì)胞選擇/標(biāo)記的優(yōu)勢

• 簡單快速地制備納米顆粒-初級(jí)小鼠抗體綴合物
• 簡單溫和的細(xì)胞分離
• 強(qiáng)而持久的熒光信號(hào)
• 一致的高質(zhì)量結(jié)果
• 高結(jié)合能力
• 高生物相容性
• 低非特異性結(jié)合

產(chǎn)品內(nèi)容

• MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒(emi 635 nm)(目錄號(hào)41005)在pH 7.4的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中提供。每瓶含1毫升溶液，粒子濃度為1毫克/毫升，足以結(jié)合2000萬個(gè)細(xì)胞。

容量:5克生物素化抗體/毫升磁珠

納米粒子尺寸:使用動(dòng)態(tài)光散射測量的200-500納米。

多分散指數(shù) < 0.2.

除磁鐵外的所有材料都應(yīng)儲(chǔ)存在4°c下。

保質(zhì)期:6個(gè)月

草案

該協(xié)議提供了濃縮10的一般指南5使用MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒(emi 635 nm)的細(xì)胞。請根據(jù)具體應(yīng)用調(diào)整試劑的量。

1. 使用前，輕輕渦旋或吸取小瓶中的MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒(emi 635 nm)。




2. 等份50 μl納米粒子溶液用于富集實(shí)驗(yàn)。

注意: 50 μl通常足以富集1-10×105細(xì)胞。細(xì)胞捕獲效率可受多種因素影響，例如細(xì)胞群體中靶細(xì)胞的頻率、細(xì)胞表面表達(dá)的抗原/表位的密度以及抗體親和力。相應(yīng)地調(diào)整納米顆粒的量。

3. 用500 μl洗滌緩沖液洗滌納米顆粒兩次。將磁鐵放在試管側(cè)面1-2分鐘，將納米顆粒從溶液中分離出來，并小心去除上清液(磁鐵仍在側(cè)面)。




4. 向納米顆粒中加入500 ng生物素偶聯(lián)的抗體(體積為100-200 μl ),并在旋轉(zhuǎn)器上孵育30-60分鐘。

注意: 50 μl納米顆粒可以結(jié)合約200 ng的抗體。

5. 用500 μl洗滌緩沖液洗滌納米顆粒-抗體綴合物兩次，以去除未結(jié)合的抗體。




6. 將納米顆粒-抗體綴合物重新懸浮于洗滌緩沖液(50 μl)中，并將其添加至細(xì)胞樣品，總體積為0.1-0.5 ml。




7. 在室溫下，將納米顆粒與細(xì)胞樣品在軌道振蕩器上孵育30分鐘。




8. 孵育后，使用磁鐵將納米顆粒(與細(xì)胞結(jié)合)從溶液中分離出來，并小心去除上清液。




9. 用500 μl細(xì)胞培養(yǎng)基洗滌納米顆粒-細(xì)胞復(fù)合物兩次。




10. 分離的細(xì)胞可以重新懸浮在細(xì)胞培養(yǎng)基中用于下游應(yīng)用。

注意:生物素偶聯(lián)抗體也可以直接加入到細(xì)胞懸液中，然后應(yīng)用納米顆粒進(jìn)行細(xì)胞捕獲。

圖一。使用生物素-抗人EpCAM抗體和MyQuVigen-鏈霉親和素納米顆粒通過MyQuVigen-抗EpCAM抗體捕獲的人類細(xì)胞的代表性圖像。

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